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      1. 國家標準物質資源共享平臺

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        系列EGFR基因突變游離DNA和質粒DNA標準物質
        作者:高運華 王迪     來源: 中國計量科學研究院      點擊次數:384      更新時間:2022-04-08 點擊分享

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        日前,中國計量科學研究院全新推出兩種EGFR游離DNA標準物質,包括EGFR(T790M)突變型和對應野生型游離DNA標準物質。該組標準物質是酶切法獲得的DNA片段,大小分布在144bp~176bp,與天然ctDNA高度一致,突變隨機分布在DNA片段位置上,能夠真實的反映和評估檢測設備和檢測方法的靈敏度。有效彌補了現有標準物質的不足,完全模擬自然條件下血液中存在的天然ctDNA生物學狀態,均勻性好,高度穩定。該組標準物質特性量值為拷貝數濃度及突變豐度比,采用經過國際比對驗證的數字PCR方法,多家聯合定值的模式,確定了其特性量值,量值準確可靠。該標準物質可用做實時熒光定量PCR、數字PCR和高通量測序方法定量測定EGFR 基因拷貝數和突變豐度的測量標準,還可用于EGFR 基因突變方法驗證和實驗室質量控制等領域。

        表1. EGFR(T790)基因野生型和突變型DNA標準物質特性量值和不確定度

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        同時,中國計量科學研究院也全新推出了12種質粒DNA形態的EGFR基因突變標準物質,該系列標準物質以pUC18空白質粒為載體,分別將18-,19-,20-,21-外顯子上30個突變、缺失位點整合到該系列質粒DNA標準物質中,同時提供對應的野生型質粒DNA標準物質。該系列標準物質的特性量值(質粒DNA質量濃度)由高分辨電感耦合等離子體質譜(HR-ICP-MS)、液相色譜-電感耦合等離子體質譜(HPLC-ICP-MS)和液相色譜-同位素稀釋質譜(HPLC-IDMS)三種不同原理的準確、可靠測量程序進行確定,同時,如有需求,可提供經分子量換算得到的拷貝數濃度值。該系列標準物質的標準值可通過GBW06502國家一級標準物質的磷含量標準值溯源至SI基本單位:摩爾(mol),千克(kg)。該標準物質可用做實時熒光定量PCR、數字PCR和高通量測序方法定量測定EGFR 基因拷貝數和突變豐度的測量標準,還可用于EGFR 基因突變方法驗證和實驗室質量控制等領域。具體量值見表2。

        表2. EGFR基因突變DNA標準物質特性量值和不確定度

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